Question

10．利用細(xì)胞工程技術(shù)制備抗人絨毛膜促性腺激素（HCG）單克隆抗體，其主要流程如下：

回答下列問(wèn)題：
（1）制備抗HCG單克隆抗體過(guò)程中，用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)．
（2）細(xì)胞DNA合成有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷．在HAT培養(yǎng)中加入了氨基嘌呤，雜交瘤細(xì)胞能連續(xù)增殖，未融合細(xì)胞以及同種融合細(xì)胞因不能增殖而死亡．由此可判斷骨髓瘤細(xì)胞DNA合成存在S（填“D”、“S”或“D和S”）途徑．
（3）步驟③需對(duì)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，該過(guò)程一般在多孔細(xì)胞培養(yǎng)板上進(jìn)行．先將細(xì)胞懸浮液稀釋到7-10個(gè)細(xì)胞/ml，再在每個(gè)培養(yǎng)孔中滴入0.1ml細(xì)胞稀釋液，其目的是使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的．
（4）用抗HCG單克隆抗體作出診斷試劑，能在妊娠初期即可作出診斷，主要是因?yàn)樵摽贵w具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動(dòng)）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）．
2、單克隆抗體的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．兩次抗體檢測(cè)：專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性．

解答 解：（1）制備單克隆抗體過(guò)程中要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞，動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞．
（2）加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人的淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖．
（3）步驟③需對(duì)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，為了使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的，一般在多孔細(xì)胞培養(yǎng)板上進(jìn)行．先將細(xì)胞懸浮液稀釋到7-10個(gè)細(xì)胞/ml，再在每個(gè)培養(yǎng)孔中滴入0.1ml細(xì)胞稀釋液．
（4）單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)．
故答案為：
（1）動(dòng)物細(xì)胞融合       動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 
（2）S
（3）使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的
（4）特異性強(qiáng)、靈敏度高

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查單克隆抗體的制備過(guò)程，意在考查考生的識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問(wèn)題的能力，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．