Question

4．轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示，質(zhì)粒上有Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等四種限制酶切割位點(diǎn)．請(qǐng)回答：

 （1）構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ對(duì)含抗病基因的DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割，再用DNA連接酶將二者“縫合”．
（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用方法有多種，除圖中所示方法外還有基因槍法法和花粉管通道法法．
（3）能使抗病基因在香蕉細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是AB（填字母序號(hào)）．
A．啟動(dòng)子 　B、終止子　C．復(fù)制原點(diǎn) 　D、標(biāo)記基因
（4）利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株．培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)物質(zhì)外還必須含有生長素和細(xì)胞分裂素等植物激素，它們會(huì)在①和②（填圖中標(biāo)號(hào)）階段發(fā)揮作用．對(duì)植株進(jìn)行抗病接種實(shí)驗(yàn)屬于個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定．

Answer 1

分析 分析題圖：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，其中SmaⅠ酶的切割位點(diǎn)位于抗病基因（目的基因）上；質(zhì)粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位點(diǎn)．所以要活動(dòng)重組質(zhì)粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ進(jìn)行切割．①表示脫分化過程、②表示再分化過程、④是新植體．

解答 解：（1）含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，但限制酶SmaⅠ的切割位點(diǎn)位于抗病基因上，對(duì)SmaⅠ位點(diǎn)進(jìn)行切割破壞了抗病基因的結(jié)構(gòu)，所以要獲得抗病基因，不能否用限制酶SmaⅠ對(duì)圖中對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割．要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒，應(yīng)選用PstⅠ、EcoRⅠ限制酶切割質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA分子．
（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法．圖中采用的是最常用的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（3）啟動(dòng)子和終止子能啟動(dòng)目的基因的轉(zhuǎn)錄與終止，是使抗病基因在香蕉細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列．
（4）植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中需要的植物激素是：生長素和細(xì)胞分裂素，在①脫分化和②再分化中發(fā)揮重要作用，在②再分化過程中需要給予一定的光照，利用芽的分化．對(duì)植株進(jìn)行抗病接種實(shí)驗(yàn)屬于個(gè)體水平的鑒定．
故答案：
（1）PstⅠ、EcoRⅠDNA連接酶
（2）基因槍法    花粉管通道法
（3）AB
（4）生長素和細(xì)胞分裂素      ①和②個(gè)體生物學(xué)水平

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程圖，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，對(duì)某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論．