Question

13．請回答與大腸桿菌純化培養(yǎng)有關的問題：
（1）制備培養(yǎng)基
配制培養(yǎng)基時各種成分在熔化后分裝前必須進行調節(jié)pH，培養(yǎng)基在接種前要進行高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（2）純化大腸桿菌
①通過接種在瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行連續(xù)劃線操作，將聚焦的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面，在數次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，這種方法稱為平板劃線法．
②用該方法統(tǒng)計樣本菌落數時是（是、否）需要設置對照組？為什么？需要判斷培養(yǎng)基是否被污染．
（3）討論分析
①純化大腸桿菌時，不可（可/不可）用加入抗生素的方法防止雜菌感染．
②用該方法分享大腸桿菌時，從第二次劃線操作起，每次總是要從上一次劃線的末端開始劃線，并劃線數次，其原因是線條的末端的細菌數量少，最終可以得到由單個細菌繁殖而形成的菌落．
③大腸桿菌與酵母菌的最本質區(qū)別是大腸桿菌無成形的細胞核．

Answer 1

分析 （1）微生物實驗室培養(yǎng)的關鍵就在于防止雜菌污染，故實驗室培養(yǎng)時需嚴格無菌操作，對培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌、培養(yǎng)皿用干熱滅菌，接種環(huán)用灼燒滅菌，實驗者的雙手用酒精擦拭消毒處理．
（2）大腸桿菌的純培養(yǎng)包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個階段．
（3）常用的微生物的接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法．

解答 解：（1）配制培養(yǎng)基時各種成分在熔化后分裝前必須進行pH的調節(jié)，接種前要進行高壓蒸汽滅菌．
（2）①題干所述接種方法為平板劃線法．
②平板劃線法接種培養(yǎng)微生物時，需要進行不接種的空白培養(yǎng)實驗以判斷培養(yǎng)基是否被污染，所以用該方法統(tǒng)計樣本菌落數時需要設置對照組．
（3）①大腸桿菌屬于細菌，對抗生素敏感，培養(yǎng)大腸桿菌時不能用加入抗生素的方法防止雜菌感染．
②平板劃線法分離大腸桿菌時，從第二次劃線操作起，每次總是要從上一次劃線的末端開始劃線，并劃線數次，其原因是線條的末端的細菌數量少，最終可以得到由單個細菌繁殖而形成的菌落．
③調查結果屬于原核生物，酵母菌屬于真核生物，它們最本質的區(qū)別是大腸桿菌無成形的細胞核．
故答案為：
（1）調節(jié)pH   高壓蒸汽滅菌法
（2）①平板劃線法
②是    需要判斷培養(yǎng)基是否被污染
（3）①不可
②線條的末端的細菌數量少，最終可以得到由單個細菌繁殖而形成的菌落
③大腸桿菌無成形的細胞核

點評 微生物的實驗室培養(yǎng)是選修一的重點內容，考生需要對各個知識點進行歸納總結，做題才能得心應手．