Question

【題目】【生物一一選修3:現(xiàn)代生物科技專題】某些適應寒冷環(huán)境的生物，能夠產(chǎn)生一類抑制冰晶生長（能降低水溶液冰點的大分子）的蛋白質，即抗凍蛋白。科學家利用昆蟲抗凍蛋白（AFPS）基因的異源表達，現(xiàn)已成功地提高了雙子葉植物——煙草的抗凍能力。請分析回答下列相關問題：

（1）為使抗凍蛋白基因在煙草細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的抗凍蛋白基因片段正確插入基因表達載體的 和 之間。

（2）利用PCR技術擴增DNA時，需要在反應體系中添加的有機物質有 、 、4種脫氧核糖核苷酸和DNA模板，擴增過程可以在PCR擴增儀中完成。

（3）將AFPS基因導人煙草細胞中，常用 法，此操作過程中使用的載體是 。若要檢測煙草是否產(chǎn)生了抗凍蛋白，一般采用 法檢測雜交帶。

（4）假如用得到的二倍體轉基因抗凍植株自交，子代中杭凍與不抗凍植株的數(shù)量比為15:1,可推測該杭凍基因整合到了 （填“一對同源染色體的一條上”“兩條非同源染色體上．”或“一對同源染色體的兩條上”）。

Answer 1

【答案】（1）啟動子 終止子

（2）引物 耐熱性的DNA聚合酶（或Taq聚合酶）（兩空位置可互換）

（3）農(nóng)桿菌轉化（1分） Ti質粒（答質粒給1分，答T-DNA不給分） 抗原—抗體雜交

（4）兩條非同源染色體上

【解析】（1）為使抗凍蛋白基因在煙草細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的抗凍蛋白基因片段正確插入基因表達載體的啟動子和終止子之間。

（2）利用PCR技術擴增DNA時，需要在反應體系中添加一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（或Taq聚合酶）、4種脫氧核糖核苷酸和DNA模板。

（3）將目的基因導入植物細胞中，常用農(nóng)桿菌轉化法，此操作過程中使用的載體是Ti質粒。檢測目的基因是否翻譯成相應的蛋白質，可采用抗原—抗體雜交技術。

（4）假如用得到的二倍體轉基因抗凍植株自交，子代中杭凍與不抗凍植株的數(shù)量比為15:1（為9:3:3:1的變式）,說明該杭凍基因整合到了兩條非同源染色體上，遵循基因的自由組合定律。