Question

7．關(guān)于凝膠色譜柱的裝填，除哪項(xiàng)外均為正確解釋（　　）

• A． 交聯(lián)葡聚糖凝膠（G-75）“G”表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值
• B． 凝膠用自來(lái)水充分溶脹后，配成凝膠懸浮液
• C． 用300ml的物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌平衡凝膠12h
• D． 色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡，必須重裝

Answer 1

分析 凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小來(lái)分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)，移動(dòng)的速度慢，相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快，因此相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離．
裝填凝膠色譜柱時(shí)，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?huì)擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果．

解答 解：A、交聯(lián)葡聚糖凝膠（Sephadex G-75）“G”表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5克，A正確；
B、在配制凝膠懸浮液時(shí)，凝膠應(yīng)用蒸餾水充分溶脹，B錯(cuò)誤；
C、裝填完后，需用300 mL的物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液（pH=7.0）充分洗滌平衡凝膠12小時(shí)，使凝膠裝填緊密，C正確；
D、色譜柱內(nèi)不能有氣泡，一旦發(fā)現(xiàn)氣泡，必須重裝，D正確．
故選：B．

點(diǎn)評(píng) 本題考查了生物技術(shù)與實(shí)踐的相關(guān)實(shí)驗(yàn)，意在考查學(xué)生是理解和應(yīng)用能力，對(duì)色譜柱裝填的方法及蛋白質(zhì)分離方法的記憶和綜合應(yīng)用是本題考查的重點(diǎn)．