Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）回答與泡菜制作有關(guān)的問題：

（1）用蘿卜等根菜類蔬菜制作泡菜，用熱水短時(shí)處理，可抑制某些微生物產(chǎn)生_____，從而使成品泡菜口感較脆。同時(shí)，該處理也會(huì)使泡菜發(fā)酵時(shí)間縮短，其原因是_______。

（2）泡菜發(fā)酵初期，由于泡菜罐加蓋并水封，會(huì)使______菌被逐漸抑制。發(fā)酵中期，乳酸菌大量繁殖，會(huì)使______菌受到抑制。發(fā)酵后期，乳酸生產(chǎn)過多，會(huì)使乳酸菌受到抑制。

（3）從泡菜汁中可分離制作酸奶的乳酸菌，首先對(duì)經(jīng)多次發(fā)酵的泡菜汁進(jìn)行過濾，然后取濾液進(jìn)行______，再用______的方法在某種含牛乳的專用的培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選。該培養(yǎng)基必須含有______，以便于觀察是否產(chǎn)酸。

（4）自然界中醋桿菌常與乳酸菌共同生長(zhǎng)。若要篩選出醋桿菌，則其專用的培養(yǎng)基中應(yīng)添加______。

（二）回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題：

（1）為了獲取某植物葉片無菌的原生質(zhì)體，先將葉片經(jīng)表面消毒并去除下表皮，再將其置于經(jīng)______處理的較高滲透壓的混合酶液中。酶解后，經(jīng)多次離心獲得原生質(zhì)體。然后測(cè)定該原生質(zhì)體的活性，可采用的方法有______（答出2點(diǎn)即可）。

（2）若要獲得已知序列的抗病基因，可采用______或PCR的方法。為了提高目的基因和質(zhì)粒重組的成功率，選擇使用______，對(duì)含目的基因的DNA片段進(jìn)行處理，使其兩端形成不同的粘性末端，對(duì)質(zhì)粒也進(jìn)行相同的處理，然后用DNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒。通過在大腸桿菌中______，以獲得大量的重組質(zhì)粒，最終將其導(dǎo)入原生質(zhì)體中。

（3）原生質(zhì)體在培養(yǎng)過程中，只有重新形成______后，才可進(jìn)行有絲分裂。多次分裂形成的小細(xì)胞團(tuán)可通過______或器官發(fā)生的途徑再生植株。

Answer 1

【答案】果膠酶 細(xì)胞破裂，細(xì)胞內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外流使乳酸菌快速地獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 喜好氧的 不耐酸的 稀釋 涂布分離 酸堿指示劑 乙醇 過濾滅菌 染色法，滲透吸水或失水 化學(xué)合成 兩種限制性核酸內(nèi)切酶 擴(kuò)增 細(xì)胞壁 胚胎發(fā)生

【解析】

泡菜制作：

①菌種：假絲酵母和乳酸菌；②發(fā)酵原理：在無氧條件下，微生物利用菜中的糖和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵產(chǎn)物有有機(jī)酸和醇類物質(zhì)等，還有亞硝酸。③亞硝酸鹽的測(cè)定：亞硝酸鹽可與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，這一產(chǎn)物再與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián)，形成紫紅色產(chǎn)物，可用光電比色法定量。

（一）

（1）用蘿卜等根菜類蔬菜制作泡菜時(shí)，為抑制某些微生物產(chǎn)生果膠酶，從而使成品泡菜口感較脆，可用熱水短時(shí)處理。同時(shí)，該處理也會(huì)使細(xì)胞破裂，細(xì)胞內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外流使乳酸菌快速地獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，從而使泡菜發(fā)酵時(shí)間縮短。

（2）泡菜發(fā)酵初期，由于泡菜罐加蓋并水封，形成無氧環(huán)境，會(huì)使喜好氧的菌被逐漸抑制。發(fā)酵中期，乳酸菌大量繁殖，產(chǎn)生乳酸，會(huì)使不耐酸的菌受到抑制。發(fā)酵后期，乳酸生產(chǎn)過多，又會(huì)抑制乳酸菌。

（3）從泡菜汁中可分離制作酸奶的乳酸菌，首先對(duì)經(jīng)多次發(fā)酵的泡菜汁進(jìn)行過濾，然后取濾液進(jìn)行稀釋，再用涂布分離的方法在某種含牛乳的專用的培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選。為了便于觀察是否產(chǎn)酸，該培養(yǎng)基必須含有酸堿指示劑。

（4）自然界中醋桿菌常與乳酸菌共同生長(zhǎng)。由于醋酸桿菌可以利用乙醇產(chǎn)生醋酸，若要篩選出醋桿菌，則其專用的培養(yǎng)基中應(yīng)添加乙醇。

（二）

（1）為了獲取某植物葉片無菌的原生質(zhì)體，先將葉片經(jīng)表面消毒并去除下表皮，再將其置于經(jīng)過濾滅菌處理的較高滲透壓的混合酶液中。酶解后，經(jīng)多次離心獲得原生質(zhì)體�？刹捎萌旧�法、滲透吸水或失水的方法測(cè)定該原生質(zhì)體的活性。

（2）可采用人工合成或PCR的方法獲得已知序列的抗病基因。對(duì)含目的基因的DNA片段進(jìn)行處理，為使其兩端形成不同的粘性末端，需要選擇使用兩種限制性核酸內(nèi)切酶，對(duì)質(zhì)粒也進(jìn)行相同的處理，為了提高目的基因和質(zhì)粒重組的成功率，然后用DNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒。通過在大腸桿菌中擴(kuò)增，以獲得大量的重組質(zhì)粒，最終將其導(dǎo)入原生質(zhì)體中。

（3）原生質(zhì)體在培養(yǎng)過程中，只有重新形成細(xì)胞壁后，才可進(jìn)行有絲分裂。多次分裂形成的小細(xì)胞團(tuán)可通過胚胎發(fā)生或器官發(fā)生的途徑再生植株。