Question

【題目】【生物——選修1:生物技術(shù)實(shí)踐】

聚對苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料類水瓶的重要原料,科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了以PET為碳源和能量來源的細(xì)菌，該發(fā)現(xiàn)對PET類材料的回收利用、環(huán)境治理意義重大。請回答下列問題：

（1）實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中獲取PET降解菌,需將土壤樣品置于________為唯一碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行選擇培養(yǎng)，其目的是______________。

（2）該實(shí)驗(yàn)小組選取PET濃度為800mg·L-1的富集液進(jìn)行系列稀釋，分別取10-3、10-4和10-5倍數(shù)的稀釋液0.1 mL涂布于培養(yǎng)基上，每個稀釋倍數(shù)涂布三個平板，各平板的菌落數(shù)分別為（286、298、297)，(35、32、31),(36、7、2),不適合用于計數(shù)的為________倍數(shù)的稀釋液,用另外兩組稀釋倍數(shù)的稀釋液進(jìn)

行計數(shù)得到的細(xì)菌數(shù)不一致的原因可能是__________________________。

（3）倒平板時應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過火焰，目的是________。在倒平板的過程中，如果培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，則這個平板不能用來培養(yǎng)大腸桿菌，原因是____________。用平板劃線法純化PET降解菌的過程中，在第二次及其后的劃線操作時,須從上一次劃線的末端開始劃線，原因是__________。

（4）在保藏PET降解菌菌種時，可采取____________的方法進(jìn)行長期保存。

Answer 1

【答案】 PET 增加PET降解菌的濃度，以確保能分離得到目的菌 10-5 稀釋倍數(shù)為10-3時，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10-4組的結(jié)果 滅菌，防止微生物污染 空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生 使細(xì)菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個細(xì)菌繁殖而成的菌落 甘油管藏

【解析】試題分析：熟記并理解微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、微生物的分離與鑒定等相關(guān)基礎(chǔ)知識、形成清晰的知識網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上從題意中提取信息并進(jìn)行作答。

(1) 欲從土壤中獲取PET降解菌,需將土壤樣品置于以PET為唯一碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行選擇培養(yǎng)，其目的是增加PET降解菌的濃度，以確保能分離得到目的菌。

(2)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)，據(jù)此結(jié)合題意可知：不適合用于計數(shù)的為10-5倍數(shù)的稀釋液。用另外兩組稀釋倍數(shù)的稀釋液進(jìn)行計數(shù)，得到的細(xì)菌數(shù)不一致的原因可能是稀釋倍數(shù)為10-3時，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10-4組的結(jié)果。

(3)倒平板時應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過火焰，其目的是滅菌，防止微生物污染。在倒平板的過程中，如果培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此這個平板不能用來培養(yǎng)大腸桿菌。用平板劃線法純化PET降解菌的過程中，為使細(xì)菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個細(xì)菌繁殖而成的菌落，在第二次及其后的劃線操作時,須從上一次劃線的末端開始劃線。

(4) 對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。