Question

圖甲乙中的箭頭表示三種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，Amp^r表示氨芐青霉素抗性基因，Ne^r表示新霉素抗性基因．下列敘述正確的是（　　）

• A、用PstⅠ和HindⅢ酶切，加入DNA連接酶后可得到1種符合要求的重組質(zhì)粒
• B、圖甲中的質(zhì)粒用BamHⅠ切割后，含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)
• C、在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用PstⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒和外源DNA
• D、導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：質(zhì)粒和外源DNA分子都含有三種限制酶切點(diǎn)，即限制酶BamHⅠ、PstⅠ和Hind III，其中BamHⅠ切割位點(diǎn)在目的基因上，所以不能用該酶切割外源DNA了．用PstⅠ和Hind III酶切質(zhì)粒切成兩個(gè)片段，用PstⅠ和Hind III酶能將外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通過DNA連接酶與質(zhì)粒連接形成的重組質(zhì)粒符合要求，而另一個(gè)重組質(zhì)粒無目的基因，不符合要求．導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌，其重組質(zhì)粒是用PstⅠ和Hind III酶切割的，其中的Amp^r（氨芐青霉素抗性基因）已被破壞，不能抗氨芐青霉素．

解答： 解：A、用PstⅠ和Hind III酶切質(zhì)粒切成兩個(gè)片段，一個(gè)含Ne^r抗性基因，另一個(gè)不含抗性基因；用PstⅠ和Hind III酶能將外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通過DNA連接酶與含Ne^r抗性基因質(zhì)粒連接形成的重組質(zhì)粒符合要求，而另一個(gè)重組質(zhì)粒無抗性基因，不符合要求，A正確；
B、圖甲中的質(zhì)粒只有一個(gè)BamHⅠ切割位點(diǎn)，切割后形成一個(gè)直鏈DNA，含2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，B錯(cuò)誤；
C、BamHⅠ切割位點(diǎn)在目的基因上，不能用該酶切割外源DNA，C錯(cuò)誤；
D、導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌，其重組質(zhì)粒是用PstⅠ和Hind III酶切割的，其中的Amp^r（氨芐青霉素抗性基因）已被破壞，D錯(cuò)誤．
故選：A．

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合題圖，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生分析題圖提取有效信息的能力，識(shí)記環(huán)狀DNA分子中無游離的磷酸基團(tuán)，而鏈狀DNA分子中含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)；識(shí)記基因表達(dá)載體中必須含有抗性基因．