Question

10．人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉htPA基因母羊的羊乳中獲得．流程如下：

（1）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數排卵．采集的精子需要經過獲能處理，才具備受精能力．
（2）htPA基因與質粒用同種限制酶切割后，通過DNA連接酶連接，以構建重組表達載體．將重組表達載體導入受精卵常用的方法是顯微注射法．檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用DNA分子雜交技術．
（3）該生物工程中，利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得多個轉htPA基因個體，這體現了早期胚胎細胞的全能性．
（4）若在轉htPA基因母羊的羊乳中檢測到htPA，說明目的基因成功表達．

Answer 1

分析 DNA重組技術至少需要三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．
目的基因分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．

解答 解：（1）對供體母羊注射促性腺激素可促使其超數排卵．采集的精子需要經過獲能處理才具備受精能力．
（2）htPA基因與載體需要用同種限制性核酸內切酶（或同種限制酶）切割，形成相同的黏性末端，然后再通過DNA連接酶連接，以構建重組表達載體．將目的導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用DNA分子雜交技術．
（3）利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得多個轉基因個體，這體現了早期胚胎細胞的全能性．
（4））若在轉htPA基因母羊的羊乳中檢測到htPA（或人組織纖溶酶原激活物），說明目的基因成功表達．
故答案為：
（1）促性腺激素    獲能
（2）DNA連接酶     顯微注射法    DNA分子雜交
（3）胚胎分割    全能性
（4）htPA

點評 本題考查了基因工程和胚胎工程的相關知識，要求考生能夠識記基因工程的操作步驟；識記細胞全能性的概念等．