Question

5．圖表示以雞血為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的操作程序，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：
（1）步驟一中，向雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水并攪拌，可使雞血細(xì)胞破裂．
（2）步驟二中，過(guò)濾后收集含有DNA的濾液．
（3）步驟三、四的操作原理是DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，
步驟四通過(guò)向溶液中加入蒸餾水調(diào)節(jié)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí)，DNA將會(huì)析出，過(guò)濾去除溶液中的雜質(zhì)．
（4）步驟七：向步驟六過(guò)濾后的濾液中，加入等體積的冷卻的酒精，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．
（5）步驟七：DNA遇二苯胺試劑，沸水浴5min，冷卻后，溶液呈藍(lán)色．

Answer 1

分析 DNA粗提取和鑒定的過(guò)程：
（1）實(shí)驗(yàn)材料的選取：凡是含有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對(duì)較高的生物組織，成功的可能性更大．
（2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液：
動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，過(guò)濾后收集濾液即可．如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜．例如，提取洋蔥的DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過(guò)濾后收集研磨液．
（3）去除濾液中的雜質(zhì)：
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA；方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同．
（4）DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過(guò)濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分．
②取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解．然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑．混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)．

解答 解：（1）步驟一中，利用滲透原理，向雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水并攪拌，可使雞血細(xì)胞破裂．
（2）步驟二中，過(guò)濾后收集含有DNA的濾液．
（3）步驟三、四的操作原理是DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；步驟四通過(guò)向溶液中加入蒸餾水調(diào)節(jié)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L（此時(shí)DNA的溶解度最�。�時(shí)，DNA將會(huì)析出，過(guò)濾去除溶液中的雜質(zhì)．
（4）步驟七：向步驟六過(guò)濾后的濾液中，加入等體積的冷卻的酒精，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．
（5）步驟七：DNA遇二苯胺試劑，沸水浴5min，冷卻后，溶液呈藍(lán)色．
故答案為：
（1）蒸餾水
（2）濾液
（3）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同    蒸餾水    0.14    
（4）濾液    酒精     白
（5）二苯胺    藍(lán)

點(diǎn)評(píng) 本題考查DNA的粗提取和提純，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累．