5.某學(xué)習(xí)小組進行“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時間的變化關(guān)系”的探究實驗.
實驗材料、用具:菌種和無菌培養(yǎng)液、試管、血球計數(shù)板 (計數(shù)室為1mm×1mm方格,由400個小格組成)、滴管、無菌水、臺盼藍染液(對活細胞無染色效果)、顯微鏡等.
(1)本實驗中,某學(xué)生的部分實驗操作過程是這樣的:①把酵母菌培養(yǎng)液放置在適宜的環(huán)境中培養(yǎng),第7天開始取樣計數(shù);②取樣前振蕩試管使得酵母菌分布均勻.用無菌吸管從試管中吸取酵母菌培養(yǎng)液少許;③培養(yǎng)液加入血細胞計數(shù)板計數(shù)室,再蓋上蓋玻片,并用濾紙吸去多余菌液.請糾正該同學(xué)實驗操作中的兩個錯誤.(指出第幾步,并說出錯誤)
①第1步,第一天開始取樣計數(shù),連續(xù)7天,進行前后對照;②第3步,先蓋上蓋玻片,再加入血球計數(shù)板計數(shù)室;
(2)本實驗沒有另設(shè)對照實驗,原因是該實驗在時間上形成前后對照.該實驗需要重復(fù)實驗,原因是避免實驗偶然性帶來的誤差.
(3)在吸取培養(yǎng)液計數(shù)前,要輕輕震蕩幾次試管,原因是使酵母菌分布均勻.
(4)某同學(xué)第5天在使用血球計數(shù)板計數(shù)時做法如下:
①振蕩搖勻試管,取1mL培養(yǎng)液并適當(dāng)稀釋(稀釋樣液的無菌水中加入了幾滴臺盼藍染液).
②制作好臨時裝片.
③顯微鏡下觀察計數(shù):在觀察計數(shù)時只計不被 (“被”或“不被”)染成藍色的酵母菌.在用血球計數(shù)板對某一稀釋10倍樣品進行計數(shù)時,發(fā)現(xiàn)在一個小方格內(nèi)(蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm)酵母菌平均數(shù)為5,據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌2×109

分析 本題研究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時間的關(guān)系,其自變量為時間,因變量為酵母菌種群數(shù)量.
酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng),培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關(guān),可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時間為坐標(biāo)軸做曲線,從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況.
利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常用的細胞計數(shù)法,這種方法可以直接測定樣品中全部的細胞數(shù)目,所以一般用于單細胞微生物數(shù)量的測定,由于血球計數(shù)板上的計數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的,所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細胞數(shù)目來計算單位體積的細胞的總數(shù)目.

解答 解:(1)該同學(xué)實驗操作中有兩個錯誤:①第1步,第一天開始取樣計數(shù),連續(xù)7天,進行前后對照;②第3步,先蓋上蓋玻片,再加入血球計數(shù)板計數(shù)室.
(2)該實驗在時間上形成前后對照,沒有另設(shè)對照實驗.為了避免實驗偶然性帶來的誤差,該實驗需要重復(fù)實驗.
(3)在吸取培養(yǎng)液計數(shù)前,要輕輕震蕩幾次試管,使酵母菌分布均勻.
(4)③顯微鏡下觀察計數(shù):被染成藍色的酵母菌為死細胞,在觀察計數(shù)時只計不被染成藍色的酵母菌.在用血球計數(shù)板對某一稀釋10倍樣品進行計數(shù)時,發(fā)現(xiàn)在一個小方格內(nèi)酵母菌平均數(shù)為5,據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌5×400÷10-4×10×10=2×109
故答案為:
(1)①第1步,第一天開始取樣計數(shù),連續(xù)7天,進行前后對照.
②第3步,先蓋上蓋玻片,再加入血球計數(shù)板計數(shù)室.
(2)該實驗在時間上形成前后對照     避免實驗偶然性帶來的誤差(或其他合理答案)
(3)使酵母菌分布均勻
(4)不被      2×109

點評 本題考查了探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化的實驗方面的相關(guān)知識,要求考生掌握調(diào)查的方式和實驗過程中的相關(guān)注意點;學(xué)會酵母菌計數(shù)的方法,并能利用公式對數(shù)量進行計算,難度適中.

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