【題目】白細胞介素是人體重要的淋巴因子，具有免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤等多種功能。近年來科學家將藥用蛋白轉(zhuǎn)向植物生產(chǎn)，如圖是將人的白細胞介素基因?qū)腭R鈴薯中，培養(yǎng)生產(chǎn)白細胞介素的過程。（tsr為一種抗生素—硫鏈絲菌素的抗性基因）

（1）提取人的白細胞介素基因適宜選用的限制酶是___________，不能使用限制酶SmaI的原因是___________。

（2）除圖示方法外，也可從利用___________法構(gòu)建的cDNA文庫中獲取目的基因。獲得目的基因后可采用PCR技術(shù)大量擴增，需提供Taq酶和___________等。

（3）將目的基因?qū)腭R鈴薯細胞常采用___________法，其原理是將目的基因?qū)?/span>Ti質(zhì)粒上的___________。

（4）為篩選出含目的基因的馬鈴薯細胞，需要在培養(yǎng)基中添加___________。最終為了檢測目的基因是否在馬鈴薯中表達，可通過____________方法進行分子水平的檢測。

【答案】PstⅠ和HindⅢ 限制酶SmaⅠ酶切位點位于白細胞介素基因中部，使用它會造成目的基因斷裂 反轉(zhuǎn)錄 引物 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 T-DNA 硫鏈絲菌素 抗原—抗體雜交

【解析】

分析題圖，圖示表示人的白細胞介素基因表達載體的構(gòu)建過程，載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點，所以切割載體和目的基因時用限制酶PstⅠ和HindⅢ，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體。獲取目的基因的方法包括從基因文庫中獲取、cDNA文庫法、供體細胞的DNA中直接分離基因（鳥槍法）。農(nóng)桿菌通過侵染植物傷口進入細胞后，可將Ti質(zhì)粒的T-DNA插入到植物基因組中。

（1）載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點，使用限制酶SmaI則會破壞目的基因；

（2）目的基因的獲取可以采用cDNA文庫法（即逆轉(zhuǎn)錄法），指以某生物成熟mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄而成的cDNA序列的重組DNA群體，采用PCR技術(shù)大量擴增，需提供Taq酶和引物等；

（3）將目的基因?qū)胫参锛毎２捎棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，利用的是Ti質(zhì)粒上的T-DNA；

（4）構(gòu)建好的表達載體含有硫鏈絲菌素的抗性基因，因此可以在培養(yǎng)基中添加硫鏈絲菌素進行篩選，為檢測目的基因是否順利表達，可以通過抗原-抗體雜交技術(shù)。

練習冊系列答案
相關(guān)習題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖表示某綠色植物的葉肉細胞在其他條件不變且比較適宜時，分別在光照強度為 a、b、c、d 時，單位時間內(nèi)CO2 釋放量和 O2 產(chǎn)生量的變化。下列敘述正確的是

A.光照強度為 a 時，葉肉細胞產(chǎn)生［H］的場所有葉綠體、線粒體、細胞質(zhì)基質(zhì)

B.光照強度為 b 時，葉肉細胞呼吸速率為 3

C.光照強度為 c 時，光合作用速率大于呼吸速率

D.光照強度為 d 時，葉肉細胞光合作用需要的二氧化碳來自自身呼吸產(chǎn)生的和從外界環(huán)境中吸收的

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】回答下列有關(guān)生物技術(shù)實踐的相關(guān)問題

Ⅰ．生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應用在一定程度上能夠減緩人類對化學燃料的消耗�？茖W家發(fā)現(xiàn)，在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應能夠合成生物柴油（如圖）。

（1）用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易揮發(fā)，宜選用__________、__________等方法從油料作物中提取。

Ⅱ．三七是一種名貴中藥，其有效成分是三七皂苷，可用萃取法提取。

（2）為了提高提取率，提取前應對三七材料進行預處理，即對其進行__________。采用萃取法提取某有效成分時需要加熱，一般不用酒精燈直接加熱而用水浴加熱，因為__________。

（3）工業(yè)化大量而快速生產(chǎn)三七以提取相關(guān)成分，可應用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，此過程會使用到生長素和細胞分裂素等植物激素，對形成的愈傷組織應當測定其__________的含量。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】在一個蜂群中，少數(shù)幼蟲一直取食蜂王漿而發(fā)育成蜂王，而大多數(shù)幼蟲以花粉和花蜜為食將發(fā)育成工蜂。DNMT3蛋白是DNMT3基因表達的一種DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶，能使DNA某些區(qū)域添加甲基基團（如下圖所示）。敲除DNMT3基因后，蜜蜂幼蟲將發(fā)育成蜂王，這與取食蜂王漿有相同的效果。下列有關(guān)敘述錯誤的是（ ）

A.被甲基化的DNA片段中遺傳信息發(fā)生改變，從而使生物的性狀發(fā)生改變

B.蜂群中蜜蜂幼蟲發(fā)育成蜂王可能與體內(nèi)重要基因是否甲基化有關(guān)

C.DNA甲基化后可能干擾了RNA聚合酶等對DNA部分區(qū)域的識別和結(jié)合

D.胞嘧啶和5′甲基胞嘧啶在DNA分子中都可以與鳥嘌呤配對

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】黑茶常被壓縮為茯磚茶，其內(nèi)的金黃色菌落俗稱“金花”，主要是冠突散囊菌，其內(nèi)含豐富的營養(yǎng)素，對人體極為有益�；卮鹣铝袉栴}：

（1）為分離茯磚茶中的冠突散囊菌，制備馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基→無菌水浸泡黑茶30min過濾獲得菌液→取0．2mL稀釋液接種在培養(yǎng)基平板上，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間觀察菌落形態(tài)并計數(shù)。由培養(yǎng)基的配方可知，冠突散囊菌屬于______________（填“細菌”、“真菌”或“放線菌”）。若采用稀釋涂布平板法，應先做系列稀釋再涂布培養(yǎng)，確保以10倍等梯度稀釋的操作是每次均從上一個稀釋倍數(shù)的試管中取1mL菌液，再加入______________中進行稀釋，移液管使用過程中的無菌操作有______________（答出兩點即可）。

（2）冠突散囊菌能分泌淀粉酶催化茶葉中的淀粉轉(zhuǎn)化低聚糖，也能分泌氧化酶催化多酚類化合物氧化，使茶葉湯色變棕紅，消除粗青味。酶催化作用的機理是_______________；欲將多種相對分子質(zhì)量不同的酶進行分離，可用______________法；淀粉酶適合采用______________法固定化技術(shù)生產(chǎn)麥芽糖漿；若要模擬冠突散囊菌分解茶湯中的成分，應該采用固定化細胞技術(shù)而非固定化酶，理由是固定化細胞能____________，使冠突散囊菌能發(fā)生連續(xù)的酶反應，分解茶湯中的成分。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下圖甲、乙為某哺乳動物處于不同分裂時期的細胞圖，丙圖為該動物細胞分裂時相關(guān)物質(zhì)或結(jié)構(gòu)數(shù)量變化的部分曲線圖。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）

A.甲圖細胞含有兩個四分體，其中發(fā)生的變異是由基因突變導致的

B.乙細胞名稱為次級精母細胞，分裂后形成子細胞的基因型是AB或aB

C.丙圖中曲線變化可表示減數(shù)分裂某段時期染色單體數(shù)的變化

D.若丙圖中曲線表示睪丸中某細胞分裂時染色體組的數(shù)目變化，則a值為1或2

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】假設DNA復制方式有三種：半保留復制、全保留復制和分散復制，復制過程如圖所示。若將蠶豆根尖細胞放在含3H的脫氧核苷酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，完成一個細胞周期，然后在不含放射性標記的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)一個細胞周期，下列說法正確的是（ ）

A.若復制方式是半保留復制，則第二次分裂前期，每條染色體上有2條核苷酸鏈有放射性

B.若復制方式是分散復制，則完成兩個細胞周期后，有兩個細胞有放射性標記

C.若復制方式是全保留復制，則第一次分裂結(jié)束后每個子代細胞中有一半染色體帶放射性

D.根據(jù)本實驗的結(jié)果可判斷出DNA復制的具體方式

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗，獲得試管苗的過程如圖所示。

回答下列問題。

（1）利用胡蘿卜根段進行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細胞可以培養(yǎng)成完整的植株，這是因為植物細胞具有__________。

（2）步驟③切取的組織塊中要帶有形成層，原因是____________。

（3）從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基，其原因是____________。在新的培養(yǎng)基上愈傷組織通過細胞的____________過程，最終可形成試管苗。

（4）步驟⑥要進行照光培養(yǎng)，其作用是____________。

（5）經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株，一般可保持原品種的__________，這種繁殖方式屬于____________繁殖。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】Ⅰ胰島素是動物體內(nèi)調(diào)節(jié)血糖的一種重要的激素。正常人進食后血糖濃度上升，胰島素分泌增多。胰島素可_______血液中葡萄糖的吸收、引起合成糖原，并抑制_________及非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟牵和瑫r胰島 α 細胞分泌_____________受抑制，使血糖濃度下降。

Ⅱ除了降低血糖時會使用胰島素外，還會在動物細胞培養(yǎng)中加入胰島素。為了探究胰島素對提高細胞克隆形成率的作用，研究者提出了以下實驗思路。請根據(jù)以下提供的實驗材料，完善實驗思路，并預測實驗結(jié)果。

實驗材料：卡氏瓶、動物細胞培養(yǎng)液、小鼠血管平滑肌細胞、葡萄糖測定儀、顯微鏡、

血細胞計數(shù)板、生理鹽水、一定濃度的胰島素溶液等。（說明：實驗所用小鼠血管平滑肌細胞是經(jīng)傳代培養(yǎng)的能增殖的細胞。）

實驗思路：

①取卡氏瓶若干個，分組如下：

甲組：動物細胞培養(yǎng)液＋小鼠血管平滑肌細胞＋生理鹽水；

乙組：動物細胞培養(yǎng)液＋小鼠血管平滑肌細胞＋_________________________。

每組設置若干個重復樣品。

②____________________________________________________。

③測定培養(yǎng)液中的葡萄糖濃度和細胞數(shù)目，求每組平均值并進行統(tǒng)計分析。

請回答：

（1）完善實驗思路中的空格。

（2）實驗目的是____________________。

（3）在使用血細胞計數(shù)板時，壓在方格線上的細胞只計__________________上的細胞數(shù)。

（4）若胰島素對上述變量均發(fā)揮效應，請預測實驗結(jié)果 （在以下坐標系中用柱形圖表示葡萄糖濃度和細胞數(shù)目變化）：

___________

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