Question

12．“煤城”淮北的煤矸石堆積如山．腐殖酸（大分子有機物）是煤矸石的主要成分之一，直接應用效果差．研究人員從煤矸石發(fā)酵的環(huán)境中篩選得到了能降解腐殖酸的細菌H4．回答下列問題：
（1）為了從自然界中獲得H4單菌落，可從煤矸石發(fā)酵的環(huán)境中取樣，并應選用以腐殖酸為唯一碳源的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，除此之外培養(yǎng)基中還應含有水、氮源和無機鹽．
（2）利用平板劃線法純化H4菌株時，劃線前需要灼燒接種環(huán)．從第一區(qū)域劃線的末端開始往笫二區(qū)域內劃線．
（3）若要測定培養(yǎng)液中H4活菌數(shù)量常用稀釋涂布平板法進行計數(shù)，其統(tǒng)計數(shù)據(jù)往往比真實值低（高/低），原因是出現(xiàn)兩個或多個細胞連在一起形成一個菌落．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求．對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用．
2、兩種純化細菌的方法的比較

	優(yōu)點	缺點	適用范圍
平板劃 線分離法	可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離	不能計數(shù)	適用于好氧菌
稀釋涂布 平板法	可以計數(shù)，可以觀察菌落特征	吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延	適用于厭氧，兼性厭氧

解答 解：（1）根據(jù)題意可知，實驗是“從煤矸石發(fā)酵的環(huán)境中篩選得到了能降解腐殖酸的細菌H4”，根據(jù)選擇培養(yǎng)基的制備原則，需要從煤矸石發(fā)酵的環(huán)境中取樣，并應選用以腐殖酸為唯一碳源的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，除此之外培養(yǎng)基中還應含有水、氮源和無機鹽．
（2）利用平板劃線法純化H4菌株時，劃線前需要灼燒接種環(huán)．從第一區(qū)域劃線的末端開始往笫二區(qū)域內劃線．
（3）若要測定培養(yǎng)液中H4活菌數(shù)量常用稀釋涂布平板法進行計數(shù)，由于兩個或多個細胞連在一起形成一個菌落，因此其統(tǒng)計數(shù)據(jù)往往比真實值低．
故答案為：
（1）腐殖酸       水、氮源和無機鹽
（2）灼燒        末端
（3）稀釋涂布平板        低     出現(xiàn)兩個或多個細胞連在一起形成一個菌落

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生能夠題干信息確定選擇培養(yǎng)基的成分，識記培養(yǎng)基的主要成分，掌握微生物分離與純化的兩種方法，難度適中．