Question

Ⅰ、下面的流程圖示意制備固定化酵母菌細胞的過程，請據(jù)圖回答：
酵母細胞活化→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合→固定化酵母細胞
（1）圖中酵母菌活化就是

 

狀態(tài)．活化前應選擇足夠大的容器，因為酵母細胞活化時

 

．
（2）影響此實驗成敗的關鍵步驟是

 

．此步的操作應采用

 

．
（3）CaCl₂溶液在形成凝膠珠時的作用原理是

 

．觀察形成的凝膠珠顏色和形狀：如果顏色過淺，說明

 

；如果形成的凝膠珠不是

 

，說明實驗操作失敗．
（4）本實驗所用的固定化技術是

 

，而制備固定化酶則不宜用此方法，原因是

 

．
Ⅱ、下圖是花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑的示意圖，請據(jù)圖回答下列問題：

（1）圖中的花粉應選自

 

的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高．
（2）這兩種途徑之間沒有絕對的界限，主要取決于

 

．
（3）圖中A、B分別表示

 

、

 

．要使B順利分化形成，培養(yǎng)基中添加的植物激素用量的比例應是

 

．

Answer 1

考點：制備和應用固相化酶,植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：1、活化是讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復正常的生活狀態(tài)；
2、凝膠珠的顏色和形狀：如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉的濃度偏低，固定的酵母細胞數(shù)目較少；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉的濃度偏高，制作失敗，需要再作嘗試．
3、剛形成的凝膠珠應在CaCl₂溶液中浸泡一段時間，以便Ca²⁺與Na⁺充分交換，形成的凝膠珠穩(wěn)定．
4、分析題圖：圖示表示培養(yǎng)花粉植株的兩種途徑，其中A表示胚狀體、B表示生根、C表示誘導過程．這兩種途徑之問沒有絕對的界限，決定花藥脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比．

解答： 解：（1）酵母菌在缺水狀態(tài)下處于休眠狀態(tài)．活化加入水使得酵母菌恢復正常的生活狀態(tài)，酵母細胞活化時體積會增大，則活化前應選擇足夠大的容器，以避免酵母菌溢出容器外．
（2）實驗成敗的關鍵是配制海藻酸鈉溶液，形成凝膠珠，應注意小火間斷加熱，防止焦糊．
（3）CaCl₂溶液在形成凝膠珠時的作用原理是Ca⁺與海藻酸鈉根離子螯合成不溶于水的海藻酸鈣凝膠；如果海藻酸鈉濃度過低，形成的凝膠珠顏色過淺，所包埋的酵母細胞數(shù)目較少．如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，說明海藻酸鈉濃度偏高，制作失敗．
（4）本實驗所用的固定化技術是包埋法；因細胞個體大，難以吸附或結合，而且不易從包埋材料中漏出，則固定化細胞一般采用包埋法固定．
Ⅱ（1）花粉植株的培養(yǎng)中，選擇合適的花粉發(fā)育時期是提高誘導成功率的重要因素，花粉應選擇細胞核由中央移向一側的單核期，此時花藥培養(yǎng)成功率高．
（2）這兩種途徑之間沒有絕對的界限，激素的種類及其濃度配比決定花藥脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織．
（3）圖示產(chǎn)生花粉植株第一種途徑是花粉經(jīng)過胚狀體階段再發(fā)育成叢芽，第二種途徑是花粉在誘導培養(yǎng)基上先形成愈傷組織階段再發(fā)育成叢芽，叢芽經(jīng)誘導生根再形成植株，兩種途徑主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比，當生長素用量比細胞分裂素用量的高時有利于根的分化．
故答案為：
Ⅰ（1）讓酵母菌恢復正常生活   體積增大較大（多）
（2）配制海藻酸鈉溶液   小火間斷加熱
（3）Ca²⁺與海藻酸鈉根離子螯合成不溶于水的海藻酸鈣凝膠
固定化酵母細胞數(shù)目較少     圓形或橢圓形
（4）包埋法  因為酶分子很小，容易從包埋材料中漏出
Ⅱ、（1）在單核期，細胞核由中央移向細胞一側（或單核居中期或單核靠邊期）
（2）培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比
（3）胚狀體   生根   生長素用量比細胞分裂素用量的比值高（或細胞分裂素用量比生長素用量的比值低）

點評：本題考查酵母細胞的固定化及月季花藥離體培養(yǎng)，意在考查學生的識記和理解能力，解題的關鍵是實驗的注意事項．屬于考綱識記層次的考查，這需要考生在平時的學習過程中注意構建知識網(wǎng)絡體系．