Question

3．在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長．下圖為獲得抗蟲棉的技術流程．請據(jù)圖回答

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因?qū)�入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定．
（2）A過程需要的酶有限制酶和DNA連接酶．
（3）在基因工程中，基因表達載體的構建非常關鍵，對表達載體的要求是必需具有啟動子、終止子、目的基因、標記基因等條件．
（3）C過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入卡那霉素．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：首先采用基因工程技術將抗蟲基因?qū)�入離體棉花葉片組織，其過程為：獲取目的基因（抗蟲基因）→構建基因表達載體→將目的基因?qū)�入農(nóng)桿菌→用含有卡那霉素的選擇培養(yǎng)基篩選含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌→利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入離體棉花葉片組織細胞．
其次采用植物組織培養(yǎng)技術，將導入抗蟲基因的細胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因抗蟲植株，其過程主要包括脫分化和再分化兩個步驟．

解答 解：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因?qū)�入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定．
（2）圖中A為基因表達載體的構建過程，該過程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，還需DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組質(zhì)粒．
（3）基因表達載體的組成包括：目的基因、啟動子、終止子和標記基因．
（4）圖中標記基因是卡那霉素抗性基因，因此C過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入卡那霉素，以淘汰不含重組質(zhì)粒的細胞．
故答案為：
（1）基因表達載體的構建   目的基因的檢測與鑒定
（2）限制酶   DNA連接酶
（3）終止子   目的基因   標記基因  
（4）卡那霉素

點評 本題結合轉(zhuǎn)基因抗蟲植株的培育過程圖，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的工具及操作步驟，能準確判斷圖中各過程的名稱；識記質(zhì)粒作為運載體的條件；掌握目的基因檢測與鑒定的方法等．