Question

8．將蘇云金桿菌Bt蛋白基因?qū)�入棉花�?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉，其過程如下圖所示（注：農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中，棉花細(xì)胞在含卡那霉素的培養(yǎng)基中無(wú)法存活．）
（1）過程①稱為基因表達(dá)載體的構(gòu)建．過程②一般用Ca²⁺（或CaCl₂）處理農(nóng)桿菌，使其易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子．
（2）在圖示過程中，導(dǎo)入目的基因的步驟是流程②③（填序號(hào)），將目的基因?qū)�入棉花�?xì)胞，除采用圖示中的方法外，還可以采用基因槍法和花粉管通道法．
（3）如要確保試管苗中含有目的基因，可在④過程的培養(yǎng)基中加入卡那霉素．
（4）圖示過程中，涉及的生物技術(shù)包括基因工程、植物組織培養(yǎng)技術(shù)．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的培育過程圖，主要包括：①基因表達(dá)載體的構(gòu)建；②將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法）；③將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，④并脫分化形成愈傷組織，⑤⑥再分化，將離體棉花植株培育成抗蟲棉還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)．

解答 解：（1）過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，需用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體（質(zhì)粒）連接形成重組質(zhì)粒．過程②表示將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞，需要用Ca²⁺處理，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使其易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子．
（2）圖中講目的基因?qū)�入棉花�?xì)胞的步驟包括將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法）和③將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)兩個(gè)步驟．圖示將目的基因?qū)�入棉花�?xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，此外還可以用基因槍法和花粉管通道法．
（3）棉花細(xì)胞在含卡那霉素的培養(yǎng)基中無(wú)法存活，而質(zhì)粒含有卡那霉素抗性基因，所以要確保試管苗中含有目的基因，可在④過程的培養(yǎng)基中加入卡那霉素．
（4）圖示抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉的獲得過程涉及的生物技術(shù)包括基因工程、植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
故答案為：
（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建   Ca²⁺（或CaCl₂）
（2）②③花粉管通道
（3）卡那霉素
（4）基因工程、植物組織培養(yǎng)技術(shù)

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合抗蟲棉的培育過程圖，考查基因工程、植物組織培養(yǎng)、基因分離定律的實(shí)質(zhì)及應(yīng)用，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具、操作步驟和應(yīng)用．