Question

17．微生物及其培養(yǎng)：
重金屬嗜好性細(xì)菌在飲用水微污染和應(yīng)急突發(fā)事件中能夠用于水污染控制處理．獲得高純度、安全、高嗜好重金屬的細(xì)菌，需要進(jìn)行系列獲取樣本及其相關(guān)培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)．實(shí)驗(yàn)室選用鉛、汞作為重金屬實(shí)驗(yàn)劑．
（1）為了較快取得高嗜好重金屬的細(xì)菌樣本，一般選擇受金屬污染或重金屬含量高的土壤浸出液．
要提純理想的菌種樣本，研究小組將實(shí)驗(yàn)分兩步，第一步是培養(yǎng)與提純高嗜好重金屬的細(xì)菌；由于這種細(xì)菌是用于飲用水的抗重金屬污染，因此，第二步必須進(jìn)行抗生素敏感性檢測(cè)．
完成下列有關(guān)“培養(yǎng)、獲取高純度、高嗜好重金屬細(xì)菌”的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路：
Ⅰ配制培養(yǎng)基：
（2）分別配制含汞、鉛不同濃度系列的固態(tài)培養(yǎng)基．
Ⅱ滅菌：
（3）采用高溫、高壓滅菌．高溫高壓滅菌有利于殺死細(xì)菌與芽孢
Ⅲ制備培養(yǎng)平板（培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基）；
Ⅳ菌種分離與培養(yǎng)：
（4）接種：用接種針取一定量的菌樣，采取分區(qū)劃線法接種在培養(yǎng)基上然后在適宜的環(huán)境中培養(yǎng)．
Ⅴ菌種選擇：
（5）選取高濃度重金屬培養(yǎng)基中的大菌落菌種備用．
選取安全性菌種的實(shí)驗(yàn)，一般采取抗生素敏感性實(shí)驗(yàn)法：
（6）對(duì)抗生素敏感性越強(qiáng)的細(xì)菌安全性越高，其判斷理由是對(duì)抗生素敏感度越高，細(xì)菌越容易被抗生素滅活，有利于保護(hù)人體健康．．
（7）用添加抗生素來(lái)篩選對(duì)抗生素高敏感的細(xì)菌，會(huì)由于這些細(xì)菌死亡而無(wú)法得到，試驗(yàn)時(shí)為準(zhǔn)確定位和獲取對(duì)抗生素高敏感的細(xì)菌，必須配制不含抗生素的對(duì)照培養(yǎng)基，在實(shí)驗(yàn)操作上，可采取先在對(duì)照培養(yǎng)基中進(jìn)行接種、培養(yǎng)，然后通過(guò)“印章”法來(lái)接種到添加抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以準(zhǔn)確定位和獲得理想的菌群．

Answer 1

分析 實(shí)驗(yàn)中要注意無(wú)菌操作，避免雜菌的污染，應(yīng)選用選擇培養(yǎng)基分離得到．
1、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法：
①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇�，此外，在接種過(guò)程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過(guò)火焰燃燒來(lái)滅菌；
②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；
③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100 kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30 min．
2、培養(yǎng)基配制時(shí)的注意事項(xiàng)：
①全程要求無(wú)菌操作，無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還能有效地避免操作者自身被微生物感染．
②培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板．可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，當(dāng)感覺(jué)到錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板．操作時(shí)應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰，以防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基．
③平板冷凝后皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，若將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染．
④在倒平板的過(guò)程中，不能將培養(yǎng)基濺到皿蓋與皿底之間的部位，因?yàn)榭諝庵械奈⑸�物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生．

解答 解：（1）為了得到重金屬嗜好性細(xì)菌，一般選擇受金屬污染或重金屬含量高的土壤浸出液．
（2）應(yīng)選用選擇培養(yǎng)基分離、提純理想的菌種樣本．需要分別配制含汞、鉛不同濃度系列的固態(tài)培養(yǎng)基．
（3）在此實(shí)驗(yàn)中要注意無(wú)菌操作，避免雜菌的污染，采用高溫、高壓滅菌．高溫高壓滅菌有利于殺死細(xì)菌與芽孢．
（4）可采用平板劃線法接種：用接種針取一定量的菌樣，采取分區(qū)劃線法接種在培養(yǎng)基上然后在適宜的環(huán)境中培養(yǎng)．
（5）選擇培養(yǎng)基分離并選取高濃度重金屬培養(yǎng)基中的大菌落菌種備用．
（6）由于對(duì)抗生素敏感度越高，細(xì)菌越容易被抗生素滅活，有利于保護(hù)人體健康，因此對(duì)抗生素敏感性越強(qiáng)的細(xì)菌安全性越高．
（7）用添加抗生素來(lái)篩選對(duì)抗生素高敏感的細(xì)菌，試驗(yàn)時(shí)為準(zhǔn)確定位和獲取對(duì)抗生素高敏感的細(xì)菌，需要配制不含抗生素的對(duì)照培養(yǎng)基，在實(shí)驗(yàn)操作上，可采取先 在對(duì)照培養(yǎng)基中進(jìn)行接種、培，然后通過(guò)“印章”法來(lái)接種到添加抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以準(zhǔn)確定位和獲得理想的菌群．
故答案為：
（1）受金屬污染或重金屬含量高
（2）汞、鉛       固
（3）細(xì)菌與芽孢
（4）用接種針取一定量的菌樣，采取分區(qū)劃線法接種在培養(yǎng)基上 
（5）高濃度重金屬培養(yǎng)基中的大菌落
（6）對(duì)抗生素敏感度越高，細(xì)菌越容易被抗生素滅活，有利于保護(hù)人體健康
（7）不含抗生素的對(duì)照    在對(duì)照培養(yǎng)基中進(jìn)行接種、培養(yǎng)

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物培養(yǎng)和分離以及考生設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的能力，解答本題的關(guān)鍵是對(duì)相關(guān)知識(shí)的識(shí)記以及考生的識(shí)圖能力、分析問(wèn)題的能力，綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決自然界和社會(huì)生活中的一些生物學(xué)問(wèn)題的能力．