Question

8．為獲得高效降低膽固醇的乳酸菌，科研人員作了如下實驗．
（1）取適量發(fā)酵酸肉，剪碎并研磨，磨碎后加入無菌水制成1：10稀釋液，再梯度稀釋到10^-6的稀釋液，涂布于添加了CaCO₃的乳酸細菌培養(yǎng)基（MRS 培養(yǎng)基）平板上，在無氧條件下恒溫靜置培養(yǎng)48小時．挑取具有溶鈣圈（或“透明圈”）的菌落，用劃線法接種在MRS培養(yǎng)基上純化．可通過觀察菌落的形態(tài)、大小判斷是否達到了純化．
（2）純化后的乳酸菌菌株接種到高膽固醇培養(yǎng)液中培養(yǎng)，一段時間后離心測定上清液中膽固醇的含量，以未接種的高膽固醇培養(yǎng)液作為對照，測定菌株降膽固醇的能力，篩選出目的菌株．

Answer 1

分析 篩選與分離微生物常用的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法．觀察菌落特征可以區(qū)分不同的微生物．回顧和梳理稀釋涂布平板法和微生物培養(yǎng)的相關知識，認真分析即可正確作答．

解答 解：（1）根據(jù)題意可知，需要將取出的含有乳酸菌的菌株剪碎并研磨，磨碎后加入無菌水制成1：10稀釋液，再梯度稀釋到10^-6的稀釋液，涂布于添加了CaCO₃的乳酸細菌培養(yǎng)基（MRS 培養(yǎng)基）平板上，由于乳酸菌是厭氧微生物，所以需要在無氧條件下下恒溫靜置培養(yǎng)48小時．挑取具有溶鈣圈（或“透明圈）的菌落，用平板劃線法接種在MRS培養(yǎng)基上純化．可通過觀察菌落的形態(tài)、大小來判斷是否達到了純化．
（2）膽固醇屬于脂質(zhì)，密度較小，存在于上清液中，所以純化后的乳酸菌菌株接種到高膽固醇培養(yǎng)液中培養(yǎng)，一段時間后離心測定上清液中膽固醇的含量，以未接種的高膽固醇培養(yǎng)液作為對照，測定菌株降膽固醇的能力，篩選出目的菌株．
故答案為：
（1）無菌水   無氧   溶鈣圈（或“透明圈”）   劃線   形態(tài)、大小
（2）上清液   未接種的高膽固醇培養(yǎng)液

點評 本題主要考查微生物的分離接種方法與微生物的培養(yǎng)基鑒定等知識，意在強化學生對相關知識的識記、理解與運用．