9．白僵菌可感染農(nóng)業(yè)害蟲，常作為防治害蟲的菌劑．由于白僵菌對除草劑草丁膦敏感，且殺死害蟲的能力較弱，科研人員對其進(jìn)行基因工程改造，流程如圖所示．

（1）從蘇云金芽孢桿菌中獲取的毒蛋白基因，通過PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增．該擴(kuò)增過程需要兩種引物，所需添加的酶是熱穩(wěn)定的DNA聚合酶．
（2）圖中形成重組質(zhì)粒1過程需要的限制酶是NcoI、BamHI，其作用是破壞DNA分子中的磷酸二酯鍵．
（3）將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入經(jīng)Ca2+處理成為感受態(tài)的白僵菌．一段時(shí)間后用含有草丁膦的平板培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，獲得含有Bar基因的重組白僵菌．
（4）科研人員將重組白僵菌噴涂于植物葉片上，以此飼喂饑餓處理的害蟲，記錄單位時(shí)間內(nèi)的死亡害蟲數(shù)，以判斷重組白僵菌的殺蟲效果．

分析 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因
（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制
（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成．

解答 解：（1）根據(jù)題意可知，可以用PCR技術(shù)體外獲得大量毒蛋白基因片段，該擴(kuò)增過程需要2種引物與兩條母鏈配對，并需要熱穩(wěn)定性DNA聚合酶，因?yàn)閿U(kuò)增的第三步需要加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成．
（2）據(jù)圖分析，毒蛋白基因兩端是NcoI、BamHI作用位點(diǎn)，因此需要NcoI、BamHI將毒蛋白基因和質(zhì)粒切割，另需要DNA連接酶連接，獲得重組質(zhì)粒l．限制酶作用的對象是切斷磷酸二酯鍵．
（3）將重組質(zhì)粒2與用鈣離子處理處于感受態(tài)的白僵菌菌液混合進(jìn)行轉(zhuǎn)化，重組質(zhì)粒2在白僵菌細(xì)胞內(nèi)被修復(fù)．一段時(shí)間后用含有草丁膦的平板培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，獲得含有Bar基因的重組白僵菌．
（4）科研人員將重組白僵菌噴涂于植物葉片上，以此飼喂饑餓處理的害蟲，記錄單位時(shí)間內(nèi)的死亡害蟲數(shù)，以判斷重組白僵菌的殺蟲效果．
故答案為：
（1）PCR   兩    熱穩(wěn)定的DNA聚合酶    
（2）Nco I、BamH I   磷酸二酯鍵
（3）Ca2+   草丁膦 
（4）死亡害蟲數(shù)

點(diǎn)評 本題考查了基因工程的有關(guān)知識，具有一定的綜合性和難度，要求考生能夠掌握基因表達(dá)載體構(gòu)建的過程；識記基因工程的工具酶，并能夠根據(jù)圖示信息進(jìn)行解題．

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：選擇題

20．如圖是酶活性影響因素相關(guān)的曲線，下列有關(guān)說法不正確的是（　�。�
A．據(jù)圖可知酶的最適溫度為M，最適pH為8
B．圖中所示反應(yīng)溶液中pH的變化不影響酶作用的最適溫度
C．溫度偏高或偏低，酶活性都會明顯降低
D．0℃時(shí)酶的活性很低，但酶的空間結(jié)構(gòu)穩(wěn)定

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科目：高中生物 來源： 題型：選擇題

20．如圖為某同學(xué)所制作的酶催化作用的模型．下列敘述正確的是（　�。�
A．該模型是物理模型，能很好地解釋酶的專一性
B．圖中的A一定是蛋白質(zhì)，因?yàn)锳是酶
C．若圖中的B表示氨基酸，A表示酶，則該生理過程表示脫水縮合
D．人成熟的紅細(xì)胞內(nèi)不能合成酶，也無上述模型表示的生理過程

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科目：高中生物 來源： 題型：多選題

17．一般情況下，以下能在動物細(xì)胞中發(fā)生的反應(yīng)是（　�。�
A．C6H12O6$\stackrel{酶}{→}$2C3H6O3+能量
B．CO2+H2O$→_{葉綠體}^{光能}$（CH2O）+O2
C．C6H12O6$\stackrel{酶}{→}$2C2H5OH+2CO2+能量
D．C6H12O6+6H2O+6O2$\stackrel{酶}{→}$6CO2+12H2O+能量

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科目：高中生物 來源： 題型：選擇題

4．如圖是兩種細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu)示意圖，請據(jù)圖判斷下列有關(guān)說法正確的是（　�。�
A．若將兩圖所示細(xì)胞同時(shí)置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3 g/mL的蔗糖溶液中，都可以觀察到質(zhì)壁分離現(xiàn)象
B．圖一所示細(xì)胞合成的抗體以主動運(yùn)輸方式進(jìn)入內(nèi)環(huán)境，需要該圖中⑤提供能量
C．向圖二所示細(xì)胞提供用18O標(biāo)記的水，發(fā)現(xiàn)有氧呼吸和光合作用產(chǎn)物中最先出現(xiàn)的放射性物質(zhì)分別是CO2和O2
D．用含18O標(biāo)記的丙氨酸的培養(yǎng)液體外培養(yǎng)圖一所示細(xì)胞，脫水縮合產(chǎn)生H218O中的18O來自于丙氨酸的羧基或R基

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科目：高中生物 來源： 題型：選擇題

14．圖中①②③④為體液的組成部分，正確的是（　�。�
A．①②③組成人體的內(nèi)環(huán)境B．相對①來說，②中蛋白質(zhì)含量較多
C．④中的液體可透過管壁直接進(jìn)入②D．在生物體中，體液大部分存在于③中

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科目：高中生物 來源： 題型：解答題

1．生長素對植物的生長具有調(diào)節(jié)作用，請回答：
（1）生長素的化學(xué)本質(zhì)是吲哚乙酸．在幼嫩組織，生長素只能從形態(tài)學(xué)上端運(yùn)輸?shù)叫螒B(tài)學(xué)下端，這種運(yùn)輸方式稱之為極性運(yùn)輸．該激素能與赤霉素（激素）協(xié)同，共同促進(jìn)植物細(xì)胞伸長．
（2）在人們認(rèn)識生長素的歷程中，有兩種不同的觀點(diǎn)對植物向光性現(xiàn)象進(jìn)行解釋：
觀點(diǎn)一：單側(cè)光導(dǎo)致了生長素由向光側(cè)轉(zhuǎn)移到了背光側(cè)；
觀點(diǎn)二：單側(cè)光導(dǎo)致向光側(cè)生長素分解；
生物小組為探究植物向光性的原理，利用胚芽鞘設(shè)計(jì)了如下兩組實(shí)驗(yàn)裝置，請回答：

①材料A應(yīng)選擇云母片（瓊脂片/云母片），為提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度，應(yīng)將兩組裝置置于相同且適宜環(huán)境中培養(yǎng)．
②結(jié)果分析：
a．如果甲彎向光源生長，而乙直立生長，則支持觀點(diǎn)一；
b．如果甲、乙均彎向光源生長，則支持觀點(diǎn)二．

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科目：高中生物 來源： 題型：選擇題

18．線粒體、葉綠體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)共同具有的是（　�。�
A．膜結(jié)構(gòu)B．能量轉(zhuǎn)換的功能
C．少量DNAD．運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)的功能

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科目：高中生物 來源： 題型：解答題

16．如圖為細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖，請據(jù)圖回答：

（1）如圖屬于真核細(xì)胞的是甲、乙，屬原核細(xì)胞的是丙，作出該判斷的主要依據(jù)是甲乙有核膜為界限的細(xì)胞核，丙沒有．
（2）如果在乙圖所示的細(xì)胞中注射一定量的用于合成物質(zhì)⑦的用3H標(biāo)記的亮氨酸，則被標(biāo)記的亮氨酸在細(xì)胞器中出現(xiàn)的先后順序是：②→①→③（填標(biāo)號）．該物質(zhì)合成所需的能量主要由[④]線粒體提供，其可被健那綠染成藍(lán)綠色．
（3）若丙圖中①表示某種細(xì)胞器，則乙圖中表示該細(xì)胞器的標(biāo)號是②．
（4）甲圖中的⑦和丙圖中的②共有的結(jié)構(gòu)或成分是DNA．

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